Coloração de Gram ou também conhecido como cor de Gram é o nome dado a um tipo de coloração diferencial é utilizado no domínio da bacteriologia para visualizar as bactérias, especialmente em amostras clínicas. O nome desta coloração deve-se ao bacteriologista dinamarquês Christian Gram, responsável pelo desenvolvimento da técnica em 1884. O principal objetivo de Gram era obter um teste que lhe permitisse diferenciar vários grupos de bactérias para estudá-los e elaborar um classificação deles. Os experimentos de vovó tiveram muito sucesso e ele rapidamente se estabeleceu como uma das principais técnicas utilizado para o estudo de bactérias, uma vez que permite uma identificação rápida e eficaz numa infecção e a escolha do antibiótico mais adequado para o tratamento dessa infecção.
O procedimento para a realização de uma coloração é o seguinte: primeiro se recolhe a amostra de bactéria a ser colorida, depois com um cotonete deve-se espalhar sobre uma lâmina e depois deixar secar em temperatura ambiente ou, caso contrário, usar isqueiro, tendo especial cuidado para não queimar as bactérias. Em seguida, a amostra deve ser fixada na lâmina com metanol por aproximadamente 1 minuto.
Posteriormente, coloque a tonalidade de genciana violeta na lâmina e deixe descansar por 1 minuto. É importante ressaltar que este corante tem a capacidade de superar qualquer tipo de parede bacteriana e é por isso que pode tingir bactérias Gram positivas e negativas. Depois disso, a amostra deve ser enxaguada com água e depois adicionado Lugol, de forma que a referida substância cubra toda a amostra e aguarde um minuto. Lugol é um composto composto em grande parte por iodo, que, neste caso, é responsável por fixar o corante violeta de genciana na amostra.
Após as etapas descritas acima, a lâmina deve ser lavada com uma mistura de álcool e acetona por um período de aproximadamente 30 dias, é nesta etapa que a coloração de Gram realmente acaba, pois a mistura de álcool e acetona é responsável por dissolver os complexos de violeta de lugol e genciana.
